NMNH: 1. Método enzimático completo "Bonzyme", respetuoso con el medio ambiente, sin residuos de solventes nocivos en polvo de fabricación. 2. Bontac es un fabricante muy pequeño en el mundo en producir el polvo de NMNH en el nivel de alta pureza y estabilidad. 3. Tecnología de purificación exclusiva de siete pasos "Bonpure", alta pureza (hasta 99%) y estabilidad de producción de polvo de NMNH 4. Fábricas propias y obtuvo una serie de certificaciones internacionales para garantizar una alta calidad y un suministro estable de productos de polvo de NMNH 5. Proporcionar un servicio integral de personalización de soluciones de productos
NADH: 1. Método enzimático completo Bonzyme, respetuoso con el medio ambiente, sin residuos de disolventes nocivos 2. Tecnología de purificación exclusiva de siete pasos Bonpure, pureza superior al 98 % 3. Forma de cristal de proceso especial patentado, mayor estabilidad 4. Obtuvo una serie de certificaciones internacionales para garantizar una alta calidad 5. 8 patentes nacionales y extranjeras de NADH, liderando la industria 6. Proporcionar un servicio integral de personalización de soluciones de productos
NAD: 1. Método enzimático completo "Bonzyme", respetuoso con el medio ambiente, sin residuos de disolventes nocivos 2. Proveedor estable de 1000+ empresas en todo el mundo 3. Tecnología única de purificación de siete pasos "Bonpure", mayor contenido de producto y mayor tasa de conversión 4. Tecnología de liofilización para garantizar una calidad estable del producto 5. Tecnología cristalina única, mayor solubilidad del producto 6. Fábricas propias y obtuvo una serie de certificaciones internacionales para garantizar una alta calidad y un suministro estable de productos.
NMN: 1. "Bonzyme"Método enzimático completo, respetuoso con el medio ambiente, sin residuos de disolventes nocivos 2. Tecnología de purificación exclusiva de siete pasos "Bonpure", alta pureza (hasta 99,9%) y estabilidad 3. Tecnología líder industrial: 15 patentes nacionales e internacionales de NMN 4. Fábricas propias y obtuvo una serie de certificaciones internacionales para garantizar una alta calidad y un suministro estable de productos. 5. Múltiples estudios in vivo muestran que Bontac NMN es seguro y eficaz 6. Proporcionar un servicio integral de personalización de soluciones de productos 7. Proveedor de materia prima NMN del famoso equipo de David Sinclair de la Universidad de Harvard
Bontac Bio-Engineering (Shenzhen) Co., Ltd. (en adelante, BONTAC) es una empresa de alta tecnología establecida en julio de 2012. BONTAC integra la investigación y el desarrollo, la producción y las ventas, con la tecnología de catálisis enzimática como núcleo y la coenzima y los productos naturales como productos principales. Hay seis series principales de productos en BONTAC, que incluyen coenzimas, productos naturales, sustitutos del azúcar, cosméticos, suplementos dietéticos e intermedios médicos.
Como líder de laNMNindustria, BONTAC tiene la primera tecnología de catálisis de enzimas completas en China. Nuestros productos de coenzima son ampliamente utilizados en la industria de la salud, la medicina y la belleza, la agricultura verde, la biomedicina y otros campos. BONTAC se adhiere a la innovación independiente, con más de170 patentes de invención. A diferencia de la industria tradicional de síntesis química y fermentación, BONTAC tiene las ventajas de la tecnología de biosíntesis verde baja en carbono y de alto valor añadido. Además, BONTAC ha establecido el primer centro de investigación de tecnología de ingeniería de coenzimas a nivel provincial en China, que también es el único en la provincia de Guangdong.
En el futuro, BONTAC se centrará en sus ventajas de tecnología de biosíntesis verde, baja en carbono y de alto valor añadido, y construirá una relación ecológica con el mundo académico, así como con los socios upstream/downstream, liderando continuamente la industria de la biología sintética y creando una vida mejor para los seres humanos.
1 、 Método enzimático, respetuoso con el medio ambiente, sin residuos de solventes nocivos en polvo de fabricación
2 、 Alta pureza (hasta 99%) y estabilidad de la producción de polvo de NAD
3 、 Fábricas propias y obtuvo una serie de certificaciones internacionales para garantizar una alta calidad y un suministro estable de productos de polvo de NAD
4 、 Múltiples estudios in vivo muestran que el polvo Bontac NAD es seguro y efectivo
5 、 Proporcionar un servicio integral de personalización de soluciones de productos
Algunas personas se refieren a las moléculas que se pueden tomar en forma de suplemento para aumentar los niveles de NAD en el cuerpo como "potenciadores de NAD". Los estudios realizados durante las últimas seis décadas sugieren que los siguientes son algunos de los muchos beneficios asociados con tomar un suplemento de NAD:
Puede ayudar a restaurar la función mitocondrial
Ayuda a reparar los vasos sanguíneos: un estudio con ratones de 2018 encontró que la suplementación podría ayudar en la reparación y el crecimiento de los vasos sanguíneos envejecidos. También hay alguna evidencia de que puede ayudar a controlar los factores de riesgo de enfermedades cardíacas como la presión arterial alta y el colesterol alto.
Puede mejorar la función muscular: un estudio en animales realizado en 2016 encontró que los músculos degenerativos habían mejorado la función muscular cuando se suplementaban con precursores de NAD+.
Ayuda potencialmente a reparar las células y el ADN dañado: algunos estudios han encontrado evidencia de que la suplementación con precursores de NAD+ conduce a un aumento en la reparación del daño del ADN. NAD+ se descompone en dos partes componentes, nicotinamida y ADP-ribosa, que se combinan con proteínas para reparar las células.
Puede ayudar a mejorar la función cognitiva: varios estudios realizados en ratones han encontrado que los ratones tratados con precursores de NAD+ experimentaron mejoras en la función cognitiva, el aprendizaje y la memoria. Los hallazgos han llevado a los investigadores a creer que el suplemento de NAD puede ayudar a proteger contra el deterioro cognitivo / enfermedad de Alzheimer.
Puede ayudar a prevenir el aumento de peso relacionado con la edad: un estudio de 2012 mostró que cuando los ratones alimentados con una dieta alta en grasas recibieron un suplemento de NAD, ganaron un 60 por ciento menos de peso que con las mismas dietas sin el suplemento. Una de las razones por las que esto puede ser cierto es que el dinucleótido de nicotinamida y adenina ayuda a regular la producción de hormonas relacionadas con el estrés y el apetito, gracias a sus efectos sobre los ritmos circadianos.
Los precursores son moléculas utilizadas en reacciones químicas dentro del cuerpo para crear otros compuestos. Hay una serie de precursores de NAD+ que dan como resultado niveles más altos cuando consumes suficientes.
Los métodos de preparación del polvo de NAD se dividen principalmente en método de síntesis química y método biocatalítico, entre los cuales el método biocatalítico incluye el método de fermentación biológica y el método de catálisis enzimática. El método de catálisis enzimática se ha convertido gradualmente en la dirección principal debido a sus ventajas ecológicas, de protección del medio ambiente y libres de contaminación. Y luego la pureza del polvo de NAD alcanzará el 99% después del procedimiento de purificación adicional.
El dinucleótido de nicotinamida y adenina (NAD) tiene varias funciones esenciales en el metabolismo. Actúa como coenzima en reacciones redox, como donante de restos de ADP-ribosa en reacciones de ADP-ribosilación, como precursor de la segunda molécula mensajera ADP-ribosa cíclica, además de actuar como sustrato para las ligasas de ADN bacteriano y un grupo de enzimas llamadas sirtuinas que utilizan NAD+ para eliminar los grupos acetilo de las proteínas. Además de estas funciones metabólicas, el NAD+ emerge como un nucleótido de adenina que puede liberarse de las células de forma espontánea y por mecanismos regulados, y por lo tanto puede tener importantes funciones extracelulares.
Primero, inspeccione la fábrica. Después de algunas proyecciones, NAD se enfrentó a que los consumidores directamente prestan más atención a la construcción de la marca. Por lo tanto, para una buena marca, la calidad es lo más importante, y lo primero para controlar la calidad de las materias primas es inspeccionar la fábrica. La empresa Bontac fabrica actualmente polvo de NAD de alta calidad con las caterias de SGS. En segundo lugar, se prueba la pureza. La pureza es uno de los parámetros más importantes del polvo de NAD. Si no se puede garantizar una alta pureza del NAD, es probable que las sustancias restantes superen las normas pertinentes. Como demuestran los certificados adjuntos, el polvo de NAD producido por Bontac alcanza la pureza del 99,9%. Finalmente, se necesita un espectro de prueba profesional para demostrarlo. Los métodos comunes para determinar la estructura de un compuesto orgánico incluyen la espectroscopia de resonancia magnética nuclear (RMN) y la espectrometría de masas de alta resolución (HRMS). Por lo general, a través del análisis de estos dos espectros, se puede determinar preliminarmente la estructura del compuesto.
La diferencia se reduce a la carga de estas coenzimas. NAD+ se escribe con un signo + en superíndice debido a la carga positiva en uno de sus átomos de nitrógeno. Es la forma oxidada del NAD. Se considera "un agente oxidante" porque acepta electrones de otras moléculas.
Aunque son diferentes químicamente, estos términos se usan indistintamente cuando se habla de sus beneficios para la salud. Otro término que puede encontrar es NADH, que significa nicotinamida adenina dinucleótido (NAD) + hidrógeno (H). Esto también se usa indistintamente con NAD+ en su mayor parte. Ambos son dinucleótidos de nicotinamida y adenina que funcionan como donantes de hidruro o aceptores de hidruro. La diferencia entre estos dos es que el NADH se convierte en NAD+ después de donar un electrón a otra molécula.
Introducción El ginsenósido Rg3 es un monómero de saponina triterpenoide tetracíclico de tipo panaxanodiol extraído de la raíz del Panax ginseng, que tiene una amplia gama de efectos farmacológicos que incluyen antitumoral, neuroprotección, protección cardiovascular, antifatiga, antioxidante, hipoglucemia y mejora de la función inmunológica. Esta investigación revela el valor potencial del ginsenósido Rg3 para dirigirse a las células madre del cáncer de mama (BCSC) para tratar el cáncer de mama, uno de los tumores más comunes en todo el mundo con una morbilidad y mortalidad significativas. Ginsenósido Rg3 como adyuvante anticancerígeno El ginsenósido Rg3 puede promover la apoptosis de las células tumorales e inhibir el crecimiento, la infiltración, la invasión, la metástasis y la neovascularización tumorales. Al mismo tiempo, tiene el efecto de reducir la toxicidad, aumentar la eficacia en la aplicación conjunta con medicamentos quimioterapéuticos, mejorar la inmunidad del organismo y revertir la resistencia a múltiples fármacos de las células tumorales. La cápsula Shenyi, un nuevo fármaco contra el cáncer con monómero de ginsenósido Rg3 como componente principal, fue aprobada por la FDA de China y comercializada en 2003, que se utiliza principalmente en el tratamiento adyuvante de varios tumores. Acerca de los BCSC Las células madre del cáncer de mama (BCSC) son un grupo de células indiferenciadas con una gran capacidad de autorrenovación y diferenciación, que es la razón principal de los malos resultados clínicos y la escasa eficacia. Las BCSC pueden proliferar clonalmente en condiciones de cultivo tridimensional sin suero y formar mamosferas. Las BCSC tienen marcadores de superficie específicos (CD44, CD24, CD133, OCT4 y SOX2) o enzimas (ALDH1). Las BCSC funcionan como posibles impulsores del cáncer de mama, que son resistentes a los tratamientos clínicos convencionales del cáncer de mama, como la radioterapia, lo que conduce a la recurrencia y metástasis del cáncer de mama. El efecto supresor del ginsenósido Rg3 en la progresión del cáncer de mama El ginsenósido Rg3 ejerce efectos inhibidores sobre la viabilidad y la clonogenicidad de las células de cáncer de mama de una manera dependiente del tiempo y la dosis. Además, suprime la formación de la mamosfera, como lo demuestra el número y el diámetro de los esferoides. Además, el ginsenósido Rg3 reduce la expresión de factores relacionados con las células madre (c-Myc, Oct4, Sox2 y Lin28) y disminuye la subpoblación de células de cáncer de mama ALDH (+). Ginsenósido Rg3 como acelerador de la degradación del ARNm de MYC El ginsenósido Rg3 deprime las BCSC principalmente a través de la regulación a la baja de la expresión de MYC, uno de los principales factores de reprogramación de células madre cancerosas con un papel fundamental en la iniciación del tumor. Su efecto regulador sobre la estabilidad del ARNm de MYC se logra principalmente mediante la promoción del grupo de microARN let-7. En condiciones normales, la familia let7 se expresa a niveles bajos en las células cancerosas, lo que da como resultado una expresión estable del ARNm de MYC y una alta expresión de c-Myc. Sin embargo, el tratamiento con Rg3 conduce a la regulación positiva del grupo let-7, deterioro de la estabilidad del ARNm de MYC, regulación a la baja de la expresión de c-Myc e inhibición de las propiedades similares a las del tallo del cáncer de mama. Conclusión El monómero tradicional chino ginsenósido Rg3 tiene el potencial de suprimir las propiedades similares a las del tallo del cáncer de mama al desestabilizar el ARNm de MYC a nivel postranscripcional, lo que se muestra muy prometedor como adyuvante para el tratamiento del cáncer de mama. Referencia Ning JY, Zhang ZH, Zhang J, Liu YM, Li GC, Wang AM, Li Y, Shan X, Wang JH, Zhang X, Zhao Y. El ginsenósido Rg3 disminuye los fenotipos similares a los tallos del cáncer de mama al afectar la estabilidad del ARNm de MYC. Am J Cancer Res. 2024 Feb 15; 14(2):601-615. PMID: 38455405; PMCID: PMC10915333. BONTAC Ginsenósidos BONTAC se ha dedicado a la investigación y desarrollo, fabricación y venta de materias primas para coenzimas y productos naturales desde 2012, con fábricas propias, más de 170 patentes globales, así como un sólido equipo de investigación y desarrollo. BONTAC tiene una rica experiencia en investigación y desarrollo y tecnología avanzada en la biosíntesis de ginsenósidos raros Rh2 / Rg3, con materias primas puras, mayor tasa de conversión y mayor contenido (hasta 99%). El servicio integral para una solución de producto personalizada está disponible en BONTAC. Con la exclusiva tecnología de síntesis enzimática Bonzyme, los isómeros de tipo S y R se pueden sintetizar con precisión aquí, con una actividad más fuerte y una acción de orientación precisa. Nuestros productos están sujetos a una estricta autoinspección de terceros, que vale la pena ser confiables. Renuncia Este artículo se basa en la referencia de la revista académica. La información relevante se proporciona solo con fines de intercambio y aprendizaje, y no representa ningún propósito de asesoramiento médico. Si hay alguna infracción, comuníquese con el autor para su eliminación. Las opiniones expresadas en este artículo no representan la posición de BONTAC. Bajo ninguna circunstancia BONTAC será responsable de ningún reclamo, daño, pérdida, gasto o costo que resulte o surja directa o indirectamente de su confianza en la información y el material de este sitio web.
1. Introducción El agotamiento de NAD+ relacionado con la edad afecta las funciones fisiológicas y contribuye a diversas enfermedades relacionadas con el envejecimiento. Los precursores de NAD+ pueden elevar significativamente el nivel de NAD+ en tejidos murinos, mitigar eficazmente el síndrome metabólico, mejorar la salud cardiovascular, proteger contra la neurodegeneración y aumentar la fuerza muscular, con amplias perspectivas en el campo relacionado con el antienvejecimiento. 2. La síntesis y el metabolismo del NAD+ en las patologías relacionadas con la edad El NAD+ se sintetiza a partir de precursores de NAD+ y aminoácidos triptófano a través de tres vías principales: De novo, Preiss-Handler y Salvage. La suplementación con precursores de NAD+ puede ser ventajosa para mantener el metabolismo celular normal regulado por NAD+ y enzimas dependientes de NAD+ como las sirtuinas, PARP, CD38 y SARM1. Los intermedios de NAD+ requieren conversión en NA para elevar el nivel de NAD+. El NAD+ y sus enzimas relacionadas con el metabolismo tienen un papel muy importante en procesos biológicos como los procesos metabólicos celulares, la expresión génica, la apoptosis y la carcinogénesis. La repleción de NAD+ está llamando la atención como una intervención antienvejecimiento. Los precursores de NAD+, como NA, NAM, NR y NMN, proporcionan efectos beneficiosos en varios modelos de enfermedades preclínicas de déficits inducidos por la edad, incluidos trastornos metabólicos, enfermedades cardiovasculares, neurodegenerativas y enfermedades musculoesqueléticas. 3. Comparación sobre la eficacia de la reposición de precursores de NAD en estudios preclínicos y estudios clínicos en patologías relacionadas con la edad La regulación a la baja del nivel de NAD+ en células y tejidos no es un fenómeno universal para las patologías relacionadas con el envejecimiento. El NAD+ simplemente disminuye con la edad en ciertos tejidos. La eficacia de los precursores de NAD+ en los estudios clínicos ha sido limitada en comparación con la de los estudios preclínicos. Cabe destacar que este problema puede abordarse siempre que se haya prestado mucha atención al metabolismo del NAD. Con respecto a la suplementación oral de precursores de NAD+, existe un vínculo obvio entre el metabolismo del NAD y los microbios intestinales. En concreto, el consumo oral de NMN se convierte en NAMN a través de la interacción con el microbioma intestinal. Además, la NAM y la NR dietéticas se convierten en NA a través de la microbiota intestinal. 4. Futuras direcciones de investigación sobre el metabolismo del NAD+ Es fundamental considerar cómo el microbioma intestinal afecta el metabolismo del NAD+, y los cambios en la composición del microbioma pueden afectar la disponibilidad de precursores del NAD+. Los estudios futuros también requieren el análisis comparativo de diferentes precursores, y es necesario investigar el papel de los microbiomas intestinales con respecto a varios intermediarios. La evaluación de cómo los precursores de NAD+ afectan a la microbiota y cómo su interacción con el metabolismo de NAD+ beneficia a la condición fisiológica es esencial para futuros estudios preclínicos y clínicos. 5. Conclusión La suplementación de precursores adecuados de NAD+ o la intervención en el metabolismo del NAD+ puede restaurar el nivel de NAD+ del cuerpo, lo cual es de gran importancia práctica para mejorar eficazmente las enfermedades relacionadas con el envejecimiento y prolongar la vida saludable. El metabolismo de los NAD involucra al microbioma intestinal, y la investigación en profundidad sobre su interacción es posiblemente un avance importante en el futuro para combatir las patologías relacionadas con el envejecimiento. Referencia Iqbal T, Nakagawa T. La perspectiva terapéutica de los precursores de NAD+ en enfermedades relacionadas con la edad. Biochem Biophys Res Commun. Publicado en línea el 2 de febrero de 2024. doi:10.1016/j.bbrc.2024.149590 Acerca de BONTAC BONTAC se ha dedicado a la investigación y desarrollo, fabricación y venta de materias primas para coenzimas y productos naturales desde 2012, con fábricas propias, más de 160 patentes globales, así como un sólido equipo de investigación y desarrollo formado por doctores y maestros. BONTAC tiene una rica experiencia en investigación y desarrollo y tecnología avanzada en la biosíntesis de NAD y sus precursores (p. ej. NMN y NR), con varias formas a seleccionar (p. ej., NAD de grado IVD sin endoxina, NAD sin Na o NAD que contiene Na; NR-CL o NR-Malate). La alta calidad y el suministro estable de productos se pueden garantizar mejor aquí con la exclusiva tecnología de purificación de siete pasos Bonpure y el método enzimático completo Bonzyme. Renuncia Este artículo se basa en la referencia de la revista académica. La información relevante se proporciona solo con fines de intercambio y aprendizaje, y no representa ningún propósito de asesoramiento médico. Si hay alguna infracción, comuníquese con el autor para su eliminación. Las opiniones expresadas en este artículo no representan la posición de BONTAC. BONTAC no se hace responsable de ninguna reclamación, daño, pérdida, gasto, coste o responsabilidad que resulte o surja directa o indirectamente de su confianza en la información y el material de este sitio web.
1. Introducción La nicotinamida adenina dinucleótido fosfato hidrógeno (NADPH), también conocida como coenzima II reducida, es un cofactor crítico en los sistemas antioxidantes celulares y la síntesis de lípidos, que vincula la resistencia a la insulina y la ferroptosis de las células β pancreáticas en el contexto de trastornos metabólicos como la diabetes mellitus, desempeñando un papel central en el mantenimiento de la homeostasis metabólica. 2. Papel biológico del NADPH NADPH funciona como una coenzima esencial para el metabolismo celular, desempeñando un papel fundamental en varios procesos biológicos críticos, como la eliminación de ROS, la producción de ROS, la síntesis de ácidos grasos y la síntesis de colesterol. 3. Vía biosintética del NADPH La producción celular de NADPH se facilita a través de varias vías, incluida la vía de las pentosas fosfato, el ciclo del ácido cítrico y el metabolismo de los ácidos grasos. El equilibrio dinámico entre la síntesis y el consumo de NADPH es esencial para preservar el equilibrio redox celular y permitir una gran cantidad de reacciones biosintéticas. 4. El papel de NADPH en la secreción de insulina de las células β pancreáticas Tanto la reacción redox como la señalización metabólica pueden modular la secreción de insulina de las células β pancreáticas, donde el NADPH juega un papel central. No solo puede servir como un factor de acoplamiento metabólico, sino que también actúa como un custodio de la integridad de las células β, administrando delicadamente la interacción entre las entradas metabólicas y la producción de insulina. 5. La interacción entre la resistencia a la insulina y el NADPH Un cuerpo sustancial de evidencia revela que NADPH es crítico para la regulación del estrés oxidativo y las respuestas inflamatorias, los principales contribuyentes a la patogénesis de la resistencia a la insulina. Específicamente, NADPH está implicado en la producción de ROS a través de NOX y también se utiliza en la síntesis de nuevos ácidos grasos, lo que contribuye al desarrollo de resistencia a la insulina, particularmente en el contexto de la inflamación crónica inducida por la obesidad. 6. El impacto de NADPH sobre la ferroptosis en el contexto de la diabetes En las células β pancreáticas, el nivel elevado de azúcar en sangre y las citoquinas proinflamatorias pueden desencadenar estrés oxidativo y acumulación de hierro para promover la peroxidación lipídica, facilitando así la ferroptosis. A cambio, la ferroptosis puede reducir la secreción de insulina y la masa de células beta, lo que contribuye a la progresión de la diabetes. En general, el NADPH juega un doble papel en la ferroptosis. Por un lado, puede promover la generación de ROS a través de NOX. Por otro lado, puede apoyar la defensa antioxidante a través de la regeneración del glutatión. En el contexto de la diabetes, el NADPH puede alimentar predominantemente los procesos que conducen a la ferroptosis, principalmente debido a la mayor actividad y afinidad de NOX, que sin embargo requiere más investigación para su verificación. 7. Conclusión NADPH tiene un papel fundamental en el complejo panorama de los trastornos metabólicos, particularmente la resistencia a la insulina y la ferroptosis. La regulación de las vías relacionadas con el NADPH puede abrir nuevas oportunidades para el tratamiento de los trastornos metabólicos. Referencia Luna, Dong-Oh. "Dinámica de NADPH: vinculación de la resistencia a la insulina y la ferroptosis de células β en la diabetes mellitus". Revista internacional de ciencias moleculares vol. 25,1 342. 26 de diciembre de 2023, doi:10.3390/ijms25010342 Ventajas y características de producción de BONTAC NADPH BONTAC tiene una rica experiencia en investigación y desarrollo y tecnología avanzada en la biosíntesis de NADPH. Se adopta el método enzimático completo Bonzyme, que es respetuoso con el medio ambiente y no deja residuos de disolventes nocivos. La pureza de NADPH puede alcanzar hasta el 95%, que se beneficia de la exclusiva tecnología de purificación de siete pasos de Bonpure. BONTAC tiene fábricas propias y ha obtenido una serie de certificaciones internacionales, donde se puede garantizar una alta calidad y un suministro estable de productos. BONTAC tiene cuatro patentes NADPH nacionales y extranjeras, liderando la industria. Renuncia Este artículo se basa en la referencia de la revista académica. La información relevante se proporciona solo con fines de intercambio y aprendizaje, y no representa ningún propósito de asesoramiento médico. Si hay alguna infracción, comuníquese con el autor para su eliminación. Las opiniones expresadas en este artículo no representan la posición de BONTAC. Bajo ninguna circunstancia BONTAC será responsable de ninguna manera por reclamos, daños, pérdidas, gastos, costos o responsabilidades (incluidos, entre otros, daños directos o indirectos por pérdida de ganancias, interrupción del negocio o pérdida de información) que resulten o surjan directa o indirectamente de su confianza en la información y el material de este sitio web.