Un método científico para cuantificar el NMN en muestras biológicas
1. Introducción
Suplementación demononucleótido de nicotinamida (NMN)para regular al alza laniveldedinucleótido de nicotinamida y adenina (NAD+)se ha dado a conocer como una prometedora intervención antienvejecimiento. Sin embargo, sigue siendoUn serio reto paracuantificar los intermedios de NAD+, NMN (en inglés) en particular. Este estudio tiene como objetivo introducir un método novedoso, la metodología LC-MS/MS mediada por isótopos dobles (dimeLC-MS/MS), para la cuantificación precisa deNMN (en inglés) en muestras biológicas.2. Factores que afectan a la detección precisa del NMN
El NMN es difícil de detectar con precisión debido a su vulnerabilidad a las enzimas.degradación, conversión en el procesamiento de muestras, sus comportamientos complejos en diferentes condiciones de columna y extracción, así como el efecto matriz.
Específicamente, el NMN tiene las propiedades de alta polaridad y baja volatilidad, que es fácil de disolver en agua pero difícil de disolver en solventes orgánicos. Estas propiedades restringen en gran medida la aplicación de muchos métodos convencionales de análisis cuantitativo.
BMuestras iológicascomola sangre transporta actividades significativas de CD38 y CD73 (ecto-5'-nucleotidasa), los cuales podrían utilizar NMN como sustrato.
El comportamiento del NMN en la columna es muy complejo, probablemente debido a la naturaleza bipartita de sus cargas, por lo que las diferencias sutiles en la extracción y las condiciones de la columna afectan significativamente la detección confiable y precisa del NMN.
3. Estrategias de afrontamiento dedimeLC-MS/MSReducir el impacto de los factores de impacto
Para evitar la interferencia de los factores antes mencionados, se deberototipocolumnaNMN-2se aplica. Esta columnacontenersPartículas de sílice de alta pureza a base de C18que son más capaces de unirse a compuestos hidrófilos que a las partículas de carbono, mejorando la capacidad de separación.pácido seclohídrico (PCA)se emplea ya que puedeextraer NAD+ de manera eficiente y NMN de muestras biológicas, como el plasma, con un mínimo de pérdidas.
Para ajustar los efectos de matriz,uncantidad fija (1 μM) de cada compuesto isotópicoYos añadido abiológicomuestras previas a la extracción de PCA.
4. La ventajasde dimeLC-MS/MS
DPatrones isotópicos de NMN, El NMN (M + 14) y el NMN (M + 5), en la metodología impulsada por LC-MS/MS, pueden rastrear con precisión el destino del NMN durante el procesamiento de muestrascuálAumenta significativamente la precisión y la fiabilidad de la medición de NMN en muestras biológicas. Además, dimeLC-MS/MS puede evaluar la eficiencia de extracción y las concentraciones absolutas de NMN en diferentes tipos de muestras biológicas.
5. Conclusión
Ésimoesnuevo LC-MS/MS-metodología impulsada con patrones de NMN de doble isotópico enlatarAccuraDe esta manera, la mayoría dey reliabLymedir el NMN en muestras biológicas. Se puede utilizar para futuros estudios sobre la ingesta de NMN.6. Bibliografía
Unno, Junya et al. "Cuantificación absoluta de mononucleótido de nicotinamida en muestras biológicas mediante cromatografía líquida mediada por isótopos dobles-espectrometría de masas en tándem (dimeLC-MS/MS)." npj aging vol. 10,1 2. 2 de enero de 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1¿Por qué elegir?BONTAC?
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